讓你從零開始搞懂PCR實驗室規(guī)劃設(shè)計

之前有小伙伴問小編如何建一個標(biāo)準(zhǔn)的PCR實驗室?PCR實驗室如何設(shè)計規(guī)劃才堪稱專業(yè)?PCR實驗室管理又有哪些注意要點?今天小編就幫你剖析PCR實驗室規(guī)劃設(shè)計標(biāo)準(zhǔn)，讓你從0開始搞懂PCR實驗室規(guī)劃設(shè)計。

PCR實驗室又叫基因擴(kuò)增實驗室,。PCR (Polymerase Chain Reaction),，中文翻譯為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，取名效法“原子核裂變鏈?zhǔn)椒磻?yīng)” ,。其反應(yīng)效果也是名符其實,，通過一對預(yù)先設(shè)計的引物、耐熱的DNA聚合酶以及反應(yīng)原料,，即可在體外模擬DNA復(fù)制的過程：

→首先將待擴(kuò)增DNA模板加熱變性解鏈;

→隨之冷卻至某一溫度時,，引物與待擴(kuò)增模板序列發(fā)生退火結(jié)合;

→再將溫度升高使退火引物在DNA聚合酶作用下得以延伸。

接下來介紹一下標(biāo)準(zhǔn)的PCR 實驗室分為四個區(qū)域,，分別為：

1.試劑配制區(qū);

2.樣品處理區(qū);

3.核酸擴(kuò)增區(qū);

4.產(chǎn)物分析區(qū);

設(shè)計要點

PCR實驗室可以是分散形式,，也可以是組合形式。完成一組PCR實驗,，通常應(yīng)經(jīng)過試劑配制,、樣品處理、核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析四個實驗過程,，若實驗工藝需要,，還應(yīng)增加樣品粉碎過程。

一,、分散形式PCR實驗室

所謂分散形式PCR實驗室,，是指完成上述實驗過程的實驗用房彼此相距較遠(yuǎn)，呈分散布置形式,。對于這種布置形式的PCR實驗室,，由于各個實驗之間不易相互干擾，因此無需特殊條件要求,。

二,、組合形式PCR實驗室

所謂組合形式PCR實驗室, 是指完成PCR四個實驗過程的實驗用房相鄰布置，組成獨立實驗區(qū)域的形式,。對于組合形式PCR實驗室,，由于各個實驗間集中布置，容易造成相互干擾,，因此,，對總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間,，以減少室內(nèi)外空氣交換,。
基因擴(kuò)增實驗室又稱PCR實驗室，其特點是能將微量的DNA大幅增加，廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個領(lǐng)域,。
PCR實驗室原則上分為四個單獨的工作區(qū)域：試劑準(zhǔn)備區(qū),、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū),。為避免交叉污染,，進(jìn)入各個工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向原則，即只能從試劑準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū),，不得逆向流動,。

基本要求：
1、各區(qū)域必須是相互獨立的,；
2,、各區(qū)域的儀器設(shè)備及各種物品必須是專用的；
3,、各區(qū)完全獨立,，緩沖間可有可無。如為一個區(qū)套一個區(qū)的模式,，區(qū)間不能直通,，必須有緩沖間，保證兩個區(qū)域間始終處于隔離狀態(tài),；
試劑準(zhǔn)備區(qū)：擴(kuò)增試劑的配制,，分裝和保存，本區(qū)氣壓應(yīng)保持微正壓,。主要設(shè)備有天平,、冰箱、離心機(jī),、加樣器,、振蕩器、紫外燈,。
標(biāo)本制備區(qū)：實驗室樣品的混樣和測試樣品的制備,。工作區(qū)域為負(fù)壓或減壓，安裝排風(fēng)系統(tǒng),。主要設(shè)備有冰箱,、生物安全柜、離心機(jī),、加樣器,、振蕩器、恒溫水浴,、紫外燈,。
擴(kuò)增區(qū)：PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系的配制和模板的加入，核酸擴(kuò)增。工作區(qū)域為負(fù)壓或減壓,，安裝排風(fēng)系統(tǒng),。主要設(shè)備有核酸擴(kuò)增設(shè)備、冰箱,、潔凈工作臺,、離心機(jī)、加樣器,、紫外燈,。
擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)：擴(kuò)增產(chǎn)物的測定。工作區(qū)為負(fù)壓,，安裝排風(fēng)系統(tǒng)。使用儀器有酶標(biāo)儀,、洗板機(jī),、加樣器和水浴箱等。
PCR實驗室規(guī)劃圖